转化效率提升百万倍
专为耐受电穿孔的非结核分枝杆菌设计,通过3 kV/mm超高场强实现高效DNA递送,突破传统方法无法转化的瓶颈。
Daoyan, Tang · Wang, Minggui · 王丹 · 杨丹妮 · 蔡毅 · 罗涛 · 和锦 · Qinglan, Wang
Microbiology spectrum 2025
超高场强电穿孔使脓肿分枝杆菌质粒转化效率比标准条件提高106倍,直接解决了该菌难以转化的问题。
表达Che9c RecET重组酶的脓肿分枝杆菌中,基因缺失突变体回收率比常规电穿孔提高超过1,000倍,使基因敲除变得高效可行。
寡核苷酸介导的重组工程在超高场条件下产生的靶向点突变体数量比常规条件多近10,000倍,便于快速引入特定突变。
该方法使原本难以操作的NTM能够构建表达文库和CRISPRi敲低文库,推进高通量功能基因组学研究。