定点O-糖基化转移酶

初始位点可编程

通过对酶活性口袋两个关键残基的交换，可重排MUC1多肽上初始O-糖基化位点，为定点合成肿瘤相关糖肽抗原提供新工具。

Zhang, Han · Song, Kaiyuan · Yihan, Liu · Yang, Fang · Lu, Congcong · Rumeng, Wei · Xu, Zhijue · Zou, Xia · 林亮 · Shi, Ting · Da, Lintai · Zhang, Yan

ACS Catalysis 2024

参数信息

获得的GalNAc-T同工酶数量

14

决定位点偏好的关键残基数

2

可交换初始位点偏好的残基交换

1

技术优势

14种酶高效可获

基于细菌表达系统获得全部14种人源GalNAc-T，且具有高催化活性，免去了繁琐的真核表达。

位点偏好可互换

仅需交换肽结合口袋中两个关键残基，即可在两个酶簇之间互换初始O-糖基化位点偏好，实现定点修饰。

机制深度解析

通过分子动力学模拟和定点突变确认了控制初始位点偏好的关键残基，量子力学计算揭示了催化机制的细节。

应用场景

• 肿瘤糖肽疫苗：合成位点精确的MUC1糖肽抗原，避免随机糖基化干扰表位识别。
• 糖基化抗原疫苗：提供定义明确的糖基化抗原，提升疫苗免疫原性的可控性。
• 糖肽合成：通过酶法定点引入O-GalNAc，代替化学法中繁琐的保护与脱保护操作。
• 糖基化分析：利用位点偏好已知的酶制备标准糖肽，辅助鉴定未知样品的糖基化位点。