耐盐Phi29聚合酶

高盐下稳定持续合成

针对纳米孔测序中高盐环境导致聚合酶失活的瓶颈，通过区室化自我复制筛选获得的突变体，在保持无外切酶活性的同时，显著提升了高盐条件下的持续合成能力。

Yaping, Sun · Danny Hsu, Ko · Jie, Gao · Kang, Fu · Gao, Yaping · Qiwen, Zhang · Baldi, Salem · Tao, Hong · Ivanov, Igor · He, Yun · Tian, Hui

Frontiers in Microbiology 2023

参数信息

耐盐突变位点数

11

技术优势

高盐下持续合成

关键氨基酸替换（G197D、Y369E、T372N、I378R）让无外切酶活性的Phi29聚合酶在高盐条件下依然保持持续合成能力，满足纳米孔测序要求。

结合亲和力增强

Y369E和T372N被确定为影响DNA聚合酶结合亲和力的关键位点，这些替换有助于聚合酶在分子拥挤或高盐环境下的底物结合。

应用场景

• 纳米孔测序：直接用于纳米孔测序反应，避免高盐下聚合酶失活。
• 单分子实时测序：提高高盐单分子实时测序中的聚合酶持续合成能力。
• 高盐环境生物传感：作为高盐传感器中保持活性的聚合酶元件。