区域选择糖基转移酶变体

6-O选择性96%

通过结构指导的蛋白质工程,该酶变体将人参皂苷Rh1的6-O糖基化选择性从10.98%大幅提升至96.26%,实现了高纯度产物的高效合成。

储建林 · 赵璐 · Xu, Xiaoli · 吴斌 · 钦松 · 何冰芳

International Journal of Biological Macromolecules 2024

参数信息

6-O区域选择性
96.26 %
人参皂苷Rh1转化率
95.57 %
人参皂苷Rh1滴度
20.48 g/L
3β-O-Glc-PPT滴度
18.04 g/L
3-O区域选择性(3β-O-Glc-PPT产物)
84.83 %
3β-O-Glc-PPT转化率
98.13 %

技术优势

高区域选择性

通过loop工程、PSPG基序进化和底物通道工程改造,6-O区域选择性从10.98%提升至96.26%。

高转化率

对人参皂苷Rh1的转化率达到95.57%,显著高于改造前的野生型。

高产滴度

利用补料分批级联反应结合UDPG循环,Rh1滴度达到20.48 g/L,3β-O-Glc-PPT达到18.04 g/L,均为迄今报道最高。

应用场景