黑曲霉碱性丝氨酸蛋白酶

多拷贝高效表达

利用CRISPR/Cas9系统在黑曲霉中实现碱性丝氨酸蛋白酶的多拷贝表达，酶产量提高2.1倍，为食品加工副产物的高值化利用提供了高效工具。

Wang, Shounan · Xue, Yibin · 张鹏 · 闫巧娟 · Li, Yanxiao · 江正强

Journal of Agricultural and Food Chemistry 2023

参数信息

蛋白酶活力

11023.2 U/mL

蛋白浓度

10.8 mg/mL

XOD抑制活性（IC50）

2.39 mg/mL

技术优势

表达量高2.1倍

在glaA、amyA和aamy基因位点连续敲入蛋白酶基因，构建多拷贝表达菌株，3.0菌株产量比1.0菌株提高2.1倍。

酶活力达11,023 U/mL

5 L发酵罐补料分批发酵，蛋白酶活力达到11,023.2 U/mL，蛋白浓度10.8 mg/mL，为碱性丝氨酸蛋白酶在曲霉中的高水平表达。

最适pH 9.0和40°C

酶的最适反应条件为pH 9.0和40 °C，适用于碱性条件下的蛋白质水解。

水解副产物得抑制肽

用该酶水解八种食品加工蛋白副产物，其中鸭血红蛋白水解物的XOD抑制活性最高，IC50为2.39 mg/mL。

应用场景

• 功能性食品配料：用该酶水解副产物得到具降尿酸潜力的XOD抑制肽，可开发为功能性食品配料。
• 生物活性肽制备：高效表达蛋白酶可直接用于水解多种食品加工副产物，生产具有XOD抑制活性的生物活性肽。