RED-CRISPR 基因敲入系统

敲入效率提升5倍

一种基于重组酶增强的同源定向修复策略，实现跨多种细胞类型的高效精准大片段DNA敲入，并显著降低脱靶突变和染色体易位。

Li, Wenqing · 蒋青 · Zhu, Xiaoli · Cao, Yuzhu · Azhar, Muhammad · Xing, Xuemei · 李福东 · 张友明 · 刘洪彬 · Cheng, Linzhao · Wang, Chengyun · 鲍坚强

Nature Communications 2025

参数信息

敲入效率

45 %

敲入率

43 %

HDR 效率提升倍数

2–5

技术优势

效率翻倍

RED-CRISPR 将 HDR 效率提升 2–5 倍，大幅减少优化实验。

脱靶更少

头对头比较显示 RED-CRISPR 显著降低脱靶突变和染色体易位。

大片段可靠

可用 8 kb 大片段成功生成基因修饰小鼠，敲入率 43%。

协同增效

与其他 HDR 增强策略联用，效率可再提升 1.5–2.5 倍。

应用场景

• 基因敲入：精确插入大片段基因，替代传统随机整合载体。
• CAR-T细胞制造：高效敲入 CAR 基因，提高 CAR-T 细胞制备效率。
• 合成生物学：在多种细胞中构建稳定表达的合成基因回路。
• 基因修饰小鼠模型：直接产生带大片段敲入的基因修饰小鼠。