CRISPR-Cas12a检测试剂盒

1小时锁定耐药突变

将CRISPR-Cas12a与RAA结合,可通过设计错配crRNA特异识别Pfexo基因的E415G突变,为疟原虫哌喹耐药监测提供快速且低成本的分子工具。

李玉玲 · 院临 · Song, Xiaonan · 李健 · 刘龙 · 刘志新 · Wang, Siqi · Yao, Yi · Yan, He · 吴凯 · 汪伟 · 尹建海 · Lin, Min · 李健

International Journal for Parasitology: Drugs and Drug Resistance 2024

参数信息

检测限(RAA-CRISPR/Cas12a)
10³ copies/μL
检测限(AS-PCR)
10⁴ copies/μL
干血斑检测阈值
100–150 parasites/μL
单次检测成本(AS-PCR)
1 $
单次检测成本(RAA-CRISPR/Cas12a)
7 $
检测时间(AS-PCR)
2-3 h
检测时间(RAA-CRISPR/Cas12a)
≤1 h

技术优势

错配设计提升特异性

在等位基因特异性引物中引入硫代磷酸酯和人工错配,在crRNA中引入错配碱基,使两种方法能准确区分E415G突变型与野生型,避免交叉反应。

1小时内出结果

RAA-CRISPR/Cas12a系统单次检测约$7,耗时不超过1小时,适合需要快速反馈的现场检测场景。

低成本适合资源有限地区

AS-PCR单次检测成本约$1,适合在仪器设备有限的地区推广,为分子监测提供经济选择。

应用场景