Gal4-BD融合SpCas9系统

敲入效率提升3倍

通过将Gal4-BD融合到SpCas9并修饰供体模板，显著提高绵羊原代细胞中大片段基因敲入效率，简化了基因编辑流程。

Yan, Li · Wu, Sujun · Yunpeng, Wu · Zhao, Yue · Wensheng, Zhang · Wang, Jin · 邱业峰

Current Issues in Molecular Biology 2025

参数信息

敲入效率

16.67 %

技术优势

敲入效率提升3倍

通过Gal4-BD与SpCas9融合及供体模板加入UAS，将同源修复模板富集在DSB位点，使大片段敲入效率从5.30%升至16.67%。

无需筛选或富集

未使用药物筛选或荧光富集即可获得较高的敲入效率，简化流程并降低细胞损伤。

应用场景

• 基因敲入：高效导入外源基因，无需筛选，加速功能研究与品系构建。
• 大片段整合：突破大片段整合效率瓶颈，支持多基因或调控元件导入。
• 细胞工程：在绵羊原代细胞中精准修改基因组，为细胞治疗模型奠定基础。
• 家畜遗传改良：可高效引入优良性状相关基因，加速家畜品种改良。