CRISPR-SpCas9M报告系统

基因编辑效率达80%

通过优化Cas蛋白、诱导剂、sgRNA、同源臂及报告基因，克服了SpCas9表达限制和CRISPR逃逸，实现新月柄杆菌高效无标记基因组编辑。

Sun, Jingxian · 于鑫 · Tang, Guiyue · Chen, Mengqing · Hu, Yucan · 李清梅 · Li, Xiaoyang · Li, Ningning · 李英英 · Lu, Ning · Tan, Wei · Yang, Yujiao · Zhao, Guohong · 王海龙 · Dai, Lei · Guo-Ping, Zhao · 艾连中 · Zhao, Wei

Nucleic Acids Research 2025

参数信息

编辑效率

80 %

技术优势

编辑效率达 80%

通过系统性优化 Cas 蛋白、诱导剂、sgRNA、同源臂和报告基因，将新月柄杆菌中的表观编辑效率提升至 80%，远超常规方法。

无需筛选标记

该系统支持无标记基因组编辑，避免残留抗生素筛选标记对后续研究和应用的干扰。

适用于多种 α-变形菌

已成功应用于农杆菌和苜蓿中华根瘤菌，证明其可作为高效的通用编辑策略，并有望推广至其他 CRISPR-Cas 难编辑生物。

应用场景

• 细菌基因组编辑：高效无标记编辑细菌基因组，加速菌株改造。
• 合成生物学：为合成生物学提供可靠的底盘编辑工具，快速构建基因回路。
• 微生物工厂：快速无标记修饰工业菌株，优化代谢通路生产目标产物。
• 细胞不对称分裂研究：高效敲除支架蛋白基因，解析不对称分裂的调控机制。