编辑窗口窄至1–2 nt
以SpRY变体突破PAM限制,在枯草芽孢杆菌中实现近乎全基因组范围的高效单碱基编辑,编辑窗口可精确控制在1–2个核苷酸,支持多基因同步编辑。
Yan, Xia · Lichao, Sun · Liang, Zeyu · Yingjie, Guo · Jing, Li · Dan, Tang · 霍毅欣 · 郭淑元
Chemical Engineering Journal 2023
基于SpRY变体的碱基编辑器能够识别基因组中几乎所有位点,无需特定PAM序列即可实现A-to-G或C-to-T转换。
通过优化系统,编辑窗口被精确控制在预选位点的1–2个核苷酸,减少脱靶和旁观者编辑。
仅需一轮编辑即可同时对双、三、四个基因进行修饰,加速菌株构建。
利用多路无PAM编辑构建菌株变异文库,实现摇瓶发酵中乙偶姻滴度提升至20.8 g/L,增幅达26.3%。