15分钟病原快检
一种工程改造的Cas12a变体,具备更强的反式切割活性和更宽松的PAM限制,在封闭式一体化反应器中可在15分钟内完成高灵敏、高特异的核酸检测。
焦健 · Liu, Yiqi · Yang, Mengli · Zheng, Jingcheng · 刘崇怀 · 叶文秀 · 宋尚伟 · 白团辉 · 宋春晖 · 王苗苗 · 史江莉 · Wan, Ran · Feng, Jiancan · 郑先波
Plant Biotechnology Journal 2023
Mb2Cas12a在较低温度下反式切割活性比其他直系同源物更强,有利于现场快速检测。
工程化变异体Mb2Cas12a-RRVRR对PAM的要求更宽松,可识别的靶标序列范围更广。
物理隔离RPA和Cas12a步骤的封闭反应容器避免了相互干扰,保持了单碱基区分能力。
封闭系统有效防止了扩增产物污染,提高了检测结果的可靠性。