热应激柑橘CRISPR/Cas9突变体

通过热应激处理提高柑橘愈伤组织中CRISPR/Cas9的突变效率,突变体突变率高且无脱靶效应。

彭爱红 · Zhiyi, Chen · Yulong, Zhu · Zhitan, Ye · 邹修平 · 何永睿 · Qiang, Li · 曹立 · 陈善春

Horticultural Plant Journal 2025

参数信息

突变效率提升
11.6 %
高突变率突变体比例
50 %

技术优势

突变效率提高11.6%

三轮37°C处理24小时、26°C处理24小时的热应激方案,与无热应激处理相比,将突变效率提高了11.6%。

五轮处理产生高突变率突变体

五轮热应激处理效果最佳,获得的突变体中50%具有100%的突变率。

不改变DNA修复途径

28°C处理10天与37°C三轮或五轮处理下的Cas9突变谱相似,表明热应激处理不影响非同源末端连接修复途径。

无脱靶突变

在与靶位点有四个核苷酸错配的潜在脱靶位点中,未检测到脱靶突变。

应用场景