双维CRISPR工具包

一步多基因编辑

在毕赤酵母中将大片段整合与多基因敲除合并为一步完成，解决了现有方法效率低和流程繁琐的问题。

Kaidi, Chen · Maimaitirexiati, Gulikezi · 李松涛 · 于爱群 · Yu, Tao · Guo, Shuyuan

Metabolic Engineering 2026

具体参数

双功能基因敲除效率范围

76.6–100 %

游离脂肪酸产量

5.82–7.30 mg/L/OD600

白藜芦醇产量

1.14–1.28 mg/L

技术优势

一步完成多重编辑

通过优化的底盘菌株和附加型载体，将大片段整合与多基因敲除合并为一步操作，无需连续多轮转化。

敲除效率高达100%

双功能基因敲除效率在76.6%到100%之间，确保在多基因操作中大多数克隆都获得预期修饰。

直接产出目标产物

应用该系统以甲醇为唯一碳源一步生产游离脂肪酸和resveratrol，展示了在C1生物制造中的实用性。

应用场景

• 毕赤酵母底盘改造：提供高效底盘菌株，用于快速构建基因编辑所需的宿主。
• 复杂代谢通路构建：一步整合多个大片段，加速复杂代谢通路的组装。
• 多基因编辑：高效同时敲除多个基因，用于多重基因组编辑。
• 甲醇生物转化：在毕赤酵母中改造甲醇利用途径，生产目标化合物。
• 高通量菌株构建：简单操作即可获得大量编辑菌株，适合高通量筛选。