位点特异 · 高灵敏 · 定量
该试剂盒利用 MazF 核酸内切酶特异性切割未甲基化 ACA 基序,保留 m6A 修饰的 RNA 进行滚环扩增,结合 MALDI-TOF MS 实现位点特异性 m6A 的绝对定量。
Han, Guobin · Lin, Qiuyuan · Yi, Jia · Qian, Lyu · Ma, Qingwei · 乔亮
Analytica Chimica Acta 2024
MazF 只识别并切割未甲基化的 ACA 基序,甲基化的 m6ACA 不会被切割,从而实现对特定位点甲基化状态的区分。
与依赖 m6A 抗体的方法相比,本方法利用酶切选择性直接区分甲基化状态,避免了抗体的非特异性结合和批次差异。
检出限低于 100 fM,线性范围覆盖 100 fM 至 10 nM,适用于低丰度样品的检测。
在大量未甲基化 RNA 存在下,仍能准确检测甲基化 RNA,相对丰度低至 0.5% 时仍可检出。