RNA编辑蛋白标记技术

内源蛋白活细胞标记

一种利用RNA编辑介导遗传密码扩展的方法，可在活细胞中瞬时、位点特异性地标记内源蛋白，无需PAM序列限制。

Ling, Xinyu · Sun, Yi · Wang, Xue · 杨延莲 · Chang, Liying · Shi, Xiaomeng · Mengxiao, Niu · 陈良怡 · 刘涛

Nature Chemical Biology 2024

参数信息

可同时标记的蛋白数量

2

技术优势

标记可逆

标记不写入基因组，不会遗传给子代；停止表达编辑元件后标记自然消失。

不用抠 PAM

RNA 编辑不需要 PAM 序列，理论上可以标记任何位点，不像 CRISPR 系工具要挑靶点。

神经元里能用

在原代神经元中成功实时标记内源离子通道和神经元特异性蛋白，说明该方法在难转染的原代细胞中有应用潜力。

一次标两个

用两种不同的 ncAA 可以同时分别标记两个蛋白，方便研究蛋白互作或多色成像。

应用场景

• 神经科学研究：可在原代神经元中实时标记离子通道，无需永久基因编辑。
• 蛋白质功能研究：内源标记避免过表达假象，保留天然调控。
• 活细胞成像：荧光 ncAA 或生物正交手柄可实现活细胞动态观察。
• 生物分析方法开发：可在活细胞中标记内源蛋白，用于开发基于生物正交反应的检测方法。