精准敲除与敲入
为工业菌株米根霉建立高效基因组编辑工具,突破其遗传操作瓶颈,可同时敲除和插入多个基因,实现代谢工程改造。
朱颢东 · Wang, Han · Wang, Li Li · 郑之明
Biotechnology journal 2024
从四个内源U6启动子中筛选出转录活性最高的一个用于sgRNA转录,保证编辑效率。
该系统可通过NHEJ和HDR两种机制高效编辑基因组,满足不同类型编辑需求。
双sgRNA系统可同时敲除或插入不同片段,实现多基因同步改造。
敲除PYC和pdcA并敲入pfkB和L-LDH后,L-乳酸产量大幅提升。