乙醇酸氧化酶变体

活性翻两倍

通过半合理设计同时提升可溶表达水平与催化活性，酶法生产乙醛酸的工业化推动剂。

Feng, Yingting · Shao, Shuai · Zhou, Xueting · Wang, Wei · 刘新 · 唐颐 · Hua, Yuhao · 郑建永 · 章银军 · 应向贤

Microorganisms 2023

参数信息

催化效率 (kcat/Km)

29.2 s⁻¹·mM⁻¹

产率

93.5 %

技术优势

催化效率提升6倍

变体GST-Gly-Ser-Gly-CreGO-Y27S/V111G/V212R的kcat/Km达29.2 s⁻¹·mM⁻¹，是野生型的6倍，大幅提高乙醛酸生产速率。

产率提高至93.5%

使用5 mg/mL粗酶和25 μg/mL过氧化氢酶催化300 mM乙醇酸甲酯8小时，产率从50.4%提升至93.5%，接近理论转化。

可溶表达水平提升

通过GST融合标签、选择pET22b载体及优化诱导条件，提高了CreGO在大肠杆菌中的可溶性表达量，简化了酶的生产。

应用场景

• 生物催化：提供高效氧化酶催化剂，用于从乙醇酸生产乙醛酸。
• 精细化学品合成：酶法合成乙醛酸，避免化学法的高能耗和副产物。
• 医药中间体：乙醛酸是多种药物合成的关键中间体，本酶可实现绿色生产。
• 香精香料：乙醛酸用于合成香兰素等香料化合物，本酶提供高效合成路线。