毫克级可溶表达
大肠杆菌可溶表达的人β-1,2-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶II,活性与哺乳动物表达相当,适用于复杂型N-糖链规模化合成。
Lu, Tian · Gao, Xiao Dong · 王宁
Journal of Bioscience and Bioengineering 2023
截短跨膜区并融合硫氧还蛋白标签,在Rosetta-Gami 2菌株中以可溶形式过表达,无需复性。
Km值为52.4 μM,与哺乳动物细胞表达的蛋白相似,说明大肠杆菌表达的酶具有适当糖基转移活性。
优化诱导条件后,亲和纯化产量约4 mg/L培养物,可放大生产。