99°C处理后活性更高
通过定向进化获得的一组突变体在高温处理后保留更高活性,其中三个突变体的催化效率显著提升,C75位点半胱氨酸替换是热稳定性提高的关键。
Xing, Hongguan · Pingping, Wang · Xing, Yan · Yi, Yang · Xinliang, Li · Liu, Rui · 周志华
Frontiers in Bioengineering and Biotechnology 2023
五个突变体在99°C处理60分钟后残余活性比亲本高9.6%–12.2%,适合饲料制粒等高温工艺。
突变体D7、E3、F8的催化效率(kcat/Km)分别提高79.8%、73.2%、92.6%,水解植酸更快。
D7、E3、F8的比活力分别是亲本的2.33、1.98、2.02倍,且高于所有已知耐热植酸酶。
所有突变体均在第75位残基发生取代,饱和突变证实C75取代是热稳定性提高的主要原因,为理性设计提供靶点。