双突变T7 RNA聚合酶

dsRNA减少99%

通过定向进化改造RNA出口通道，显著降低体外转录中的dsRNA副产物，提升mRNA疗法的安全性与纯度。

贺伟 · 吴小芹 · Qi, Geng · 叶建仁 · 何玉财 · Jin, Qiuheng

International Journal of Biological Macromolecules 2026

参数信息

突变位点

2

技术优势

机制导向的改造

研究揭示RNA出口通道同时参与转录终止和dsRNA副产物形成，据此改造的聚合酶在出口通道处至少携带一个突变，双突变体进一步验证了该机制。

直接可用

该双突变聚合酶可直接用于体外转录反应，无需额外纯化步骤或添加剂，是下一代mRNA疗法的理想候选酶。

应用场景

• mRNA疗法：用该聚合酶生产mRNA药物，可避免dsRNA引起的免疫毒性，提高安全性和有效性。
• 体外转录：在体外转录反应中直接替代野生型T7 RNAP，无需改变现有流程即可获得高纯度mRNA。
• 酶工程：通过理性改造RNA出口通道，获得性能显著提升的聚合酶，展示结构-功能指导的酶设计策略。
• 定向进化：利用噬菌体辅助连续进化从文库中筛选出dsRNA生成极低的突变体，提供定向进化新案例。