一次敲除34 kbp
基于等位基因交换的无标记敲除方法,可高效删除假单胞菌中长达34 kbp的基因盒,不引入选择标记基因。
汉丰 · Yu, Yongxin · 王永杰
Applied Biochemistry and Biotechnology 2023
借助无缝克隆高效组装同源臂与自杀质粒,可一次删除长达34 kbp的双基因盒,远超常规方法。
通过蔗糖反向筛选去除质粒骨架,获得无选择标记基因的突变株,便于后续叠加改造。
已成功应用于 P. putida、P. composti 和 P. khazarica 三种假单胞菌,表明方法具广谱性。