甲基化CRISPR传感系统

超灵敏检测Dam甲基转移酶

通过工程化共识序列将Dam甲基化与Cas12a识别整合，结合杂交链式反应放大，实现对目标酶的低至0.00032 U/mL的灵敏检测。

Zhuqi, Sui · Baoqiang, Chen · 吴荣荣 · 徐建国 · 董海燕

Analytical Chemistry 2026

参数信息

检测限

0.00032 U mL⁻¹

回收率范围

98.16-100.03 %

5-氟尿嘧啶 IC50

1.75 μM

青霉素G IC50

11.9 μM

技术优势

选择性极好

对非目标甲基转移酶几乎无响应，在多种干扰酶存在下信号保持稳定，避免假阳性结果。

能直接测抑制剂

平台可直接给出抑制剂的IC50值，用于评价药物对Dam活性的抑制效果，无需额外建立方法。

逻辑门设计通用

NAND逻辑门框架可定制，通过替换识别序列即可拓展到其他酶活性分析，无需重新设计整体方案。

应用场景

• DNA甲基转移酶活性检测：直接定量Dam活性，无需放射性标记或抗体。
• 表观遗传疾病标志物筛查：用于检测临床样本中异常甲基化酶水平，辅助疾病诊断。
• 甲基转移酶抑制剂筛选：通过IC50值快速评估候选化合物的抑制效力。