猪流行性腹泻病毒
将依赖纯化和实验室条件的RT-qPCR转化为无纯化、抗污染、可直接处理临床粗样本的一步法检测,特别适合现场猪场环境。
Xuan, Zhang · Zhuhao, Pan · Jiafeng, Wen · Chen, Wang · Chao, Tang · 唐中林
Analytica Chimica Acta 2026
优化的80°C热裂解7分钟即可从肛拭子和粪便粗样本中释放可扩增病毒RNA,省去柱纯化步骤。
CRISPR工作流在肛拭子和粪便基质中的抑制率分别为7.16%和11.89%,而RT-qPCR高达63.65%和69.39%(P<0.01)。
逆转录、RPA、T7体外转录和Cas13a切割均在同一密封管中进行,消除了开管转移和气溶胶污染风险。
297份临床样本双盲检测与国家标准一致率为98.65%,Cohen's κ=0.941,且额外检出4例RT-qPCR漏检的低滴度感染。