均相高灵敏
一种用于FTO去甲基化酶检测的DNAzyme-RCA电路,通过去磷酸化开关实现低背景信号和高灵敏度。
Huang, Xing · Zhang, Yanfei · Tong, Yanli · Shi, Yakun · 邹小勇 · 许宇智 · 戴宗
Analytical Chemistry 2023
上游切割引物带有2′,3′-环磷酸酯末端,不能直接被RCA延伸,必须经T4多核苷酸激酶去磷酸化才能启动扩增,从而避免了传统方法中直接使用切割引物导致的高背景。
由于背景信号被内在阻断,检测可在均相体系中进行,不需要异相方法中的分离和清洗步骤,从而简化操作并提高通量。
本方法的相对标准偏差(RSD)为0.8–2.0%,远低于异相方法,表明检测精密度高。