自递送Cas9 RNP

免载体高效入胞

将Cas9蛋白与穿膜肽融合，无需任何载体即可被细胞高效摄取并在体内外进行基因组编辑。

Chen, Kai · Stahl, Elizabeth C. · Kang, Min · Allen, Ryan · Trinidad, Marena · Jennifer A. Doudna

Nature Communications 2024

技术优势

无需转染试剂

融合穿膜肽的Cas9蛋白能够自行进入细胞，无需脂质体、电穿孔等辅助手段，简化操作并降低对细胞的损伤。

编辑效率提升

经过筛选和优化，含有三个拷贝A22p肽的C端融合Cas9蛋白编辑效率显著高于其他构建体，在神经祖细胞中表现突出。

体内直接注射有效

自递送Cas9 RNP可直接注射到小鼠纹状体，对临床相关基因产生稳健的基因组编辑，无需病毒载体或额外递送工具。

应用场景

• 神经基因组编辑：可直接注射到脑组织编辑神经细胞，无需病毒载体或化学转染。
• 体外基因编辑：与sgRNA混合后即可用于细胞编辑，省去转染试剂和电穿孔。
• 无载体递送：融合穿膜肽的Cas9蛋白可自行入胞，无需任何辅助材料。
• 脑部疾病模型：通过直接注射对脑内基因进行编辑，可用于建立或纠正疾病模型。