环状引导RNA

编辑效率最高提升40倍

一种经过工程化改造为环状结构的自由引导RNA，在无需Cas核酸酶预结合的情况下显著提高稳定性，从而增强Cas12a和Cas13d的编辑效率。

Zhang, Xin · Lv, Jie · 黄洪新 · 王佳泓 · Tan, Zhihong · Huang, Guanjie · Liu, Yuchen · Li, Menghao · Li, Lian · Ma, Shufeng · 黄韬 · 林瑛 · 赵小阳 · 荣知立

Genome Biology 2023

参数信息

单基因编辑效率提升倍数
2.1 ×
单基因编辑效率提升倍数
40.2 ×
多重基因编辑效率提升倍数
1.7 ×
多重基因编辑效率提升倍数
2.1 ×
RNA干扰效率提升倍数
1.8 ×

技术优势

编辑效率大幅提升

环状自由gRNA提高稳定性，使Cas12a可用的gRNA增多，单基因编辑效率最高提升40.2倍，多重编辑最高提升2.1倍。

Cas13d干扰增强

环状gRNA同样促进Cas13d的装载，使RNA干扰效率提升约1.8倍。

体内编辑更有效

在小鼠肝脏中，环状gRNA激活基因表达和切割基因组DNA的能力均强于线性对照。

不影响特异性

环状化改造未降低编辑特异性，可在多个位点和细胞系中安全使用。

应用场景