实时监测AP-1活性
通过CRISPR/Cas9将AP-1-LuciGFP报告基因整合到AAVS1安全位点,实现对人胚胎干细胞分化、命运转变及疾病建模中AP-1活性的实时监测。
张萌 · 虞游 · 沈振亚
Stem Cell Research 2024
报告基因插入AAVS1位点,该位点被公认为基因编辑安全港,避免了随机整合带来的位置效应和潜在致瘤风险。
报告基因同时编码荧光素酶和GFP,既能用活细胞荧光成像做单细胞分析,又能用发光检测做群体定量。
通过CRISPR/Cas9技术将报告基因整合到基因组,避免了传统转基因随机插入的不确定性,确保报告基因稳定表达。
报告基因受AP-1结合位点驱动的启动子控制,可实时反映AP-1转录活性,用于分化、命运转变等动态过程。