免PAM CRISPR/Cas12a生物传感器

3 CFU·mL⁻¹ 检出限

通过PNA辅助自折叠等温扩增摆脱PAM序列限制，实现对鼠伤寒沙门氏菌的直接检测。

Jiahong, Wang · Zebin, Zhang · Li, Chenxi · Hao, Zhuo · 冯秀丽 · Li, Chang · Wan, Jiayu

International Journal of Biological Macromolecules 2025

参数信息

检出限

3 CFU·mL⁻¹

技术优势

不挑靶点

PNA精确侵入双链DNA形成单链，使CRISPR/Cas12a无需PAM序列即可识别靶标，扩大了可检测的基因区域。

灵敏度高

该平台仅用一个引物即可产生大量单链DNA扩增子，检测限低至3 CFU·mL⁻¹沙门氏菌。

单引物放大

自折叠引物与靶DNA互补时形成发夹结构，暴露连续杂交启动位点，省去了传统等温扩增所需的多种引物。

应用场景

• 食源性病原体检测：直接检测沙门氏菌，免PAM限制让探针设计更自由。
• 细菌感染快速诊断：等温扩增不依赖热循环仪，适合临床样本的快速筛查。
• 病原微生物现场检测：单引物方案简化了现场检测的操作流程。
• 食品安全监控：低至3 CFU·mL⁻¹的灵敏度满足食品样本的痕量检测需求。