一锅CRISPR核酸定量检测法

免PAM双crRNA

通过调优RPA与CRISPR/Cas12a的动态反应平衡，在单管反应中实现核酸的灵敏定量检测，无需PAM序列限制。

Zhihao, Yao · He, Kaiyu · 徐岩 · 王强 · 徐霞红 · 吴群 · Wang, Liu

ACS Sensors 2024

技术优势

定量媲美qPCR

对发酵食品和临床样本的定量性能与定量实时PCR相当。

无需PAM序列

利用双无PAM crRNA进行CRISPR/Cas12a识别，扩大了靶标范围。

扩增可调

通过调节RPA引物浓度可显著影响扩增效率和定量性能。

应用场景

• 核酸检测：免PAM的CRISPR定量检测，无需复杂仪器即可定量靶标核酸。
• 病原体检测：直接定量样本中的病原体核酸载量，如SARS-CoV-2。
• 即时诊断：单管等温反应，无需热循环仪，适合现场快速定量检测。
• 食品安全检测：可定量食品中的乳酸杆菌等微生物污染。