无T-DNA插入桦树突变体

同源缺失18 bp

通过RNP直接递送实现无标记基因整合的精确基因编辑，避免了传统CRISPR/Cas9方法中T-DNA随机插入带来的风险。

王微 · Qiu, Zhinan · Shuang, Li · Bai, Xiang Dong · 刘桂丰 · 姜静

Journal of Nanjing Forestry University (Natural Sciences Edition) 2024

参数信息

缺失长度
18 bp
轰击距离
12 cm
轰击压力
7584.5 kPa
暗培养时间
25 d

技术优势

无外源DNA整合

直接递送Cas9蛋白和gRNA复合物，基因组不残留T-DNA或标记基因，突变体更接近自然变异，法规风险更低。

同源精确缺失

测序确认突变体在BpGLK1基因上为同源18 bp缺失，无野生型等位基因，表型稳定。

RNA-free DNA-free

采用体外预组装RNP，不涉及DNA表达载体，避免基因整合和长期表达，减小脱靶风险。

应用场景