耐盐苯丙氨酸脱氢酶
催化效率翻倍
针对非天然手性氨基酸合成中底物结合口袋的工程化改造,通过多点突变显著增强了还原胺化活性。
Yuxin, Chen · Qian, Zhang · Hangbin, Lei · Yulong, Han · 王世珍
Chemical Engineering Science 2025
具体参数
- kcat/Km 提高倍数(PheDH/Gly60Thr/Lys76Ser)
- {'zh': '1.96', 'en': '1.96'} ×
- kcat/Km 提高倍数(PheDH/Lys76Ser/Tyr285Leu)
- {'zh': '2.03', 'en': '2.03'} ×
技术优势
催化效率翻倍
双突变体 PheDH/Lys76Ser/Tyr285Leu 的 kcat/Km 较野生型提高 2.03 倍,底物转化更快。
口袋更疏水
分子对接显示突变扩大了底物结合口袋体积并增强疏水性,利于底物结合。
耐盐耐有机溶剂
研究了金属离子、盐浓度和有机溶剂耐受性,酶在较宽条件下保持活性。
应用场景
- 非天然手性氨基酸合成:催化非天然手性氨基酸的合成,替代化学不对称合成。
- 生物催化还原胺化:高效催化 EOPB 的还原胺化生成 L-HPA。
- 手性中间体制备:为血管紧张素转换酶抑制剂生产手性中间体。
- 血管紧张素转换酶抑制剂前体:合成用于 ACE 抑制剂的关键前体 L-HPA。