无模板高效敲除
一种基于FnCas12a和NHEJ的细菌基因组编辑工具,无需供体DNA即可在植物病原菌中实现高效、多重和迭代基因敲除。
Yan, Fang · Wang, Jingwen · Sujie, Zhang · Lu, Zhenwan · Shaofang, Li · 纪志远 · 宋从凤 · Gongyou, Chen · Xu, Jin · Jie, Feng · 周雪平 · 周焕斌
PLoS Pathogens 2023
只用Cas12a和NHEJ蛋白即可完成基因敲除,不需要构建和提供供体DNA,简化实验流程。
同一体系可同时敲除多个基因,也能连续多轮编辑,甚至删除整个基因簇或清除质粒。
全基因组测序显示无明显脱靶效应,编辑特异性高,适合用于精准功能研究。
除稻黄单胞菌外,也适用于番茄细菌性叶斑病菌,扩大了应用范围。