CRISPR/Cas12a检测法

灵敏度提升100倍

结合巢式PCR与CRISPR/Cas12a的检测方法，以超高灵敏度和特异性识别肿瘤相关的环状DNA。

Liu, Gege · Wu, Junlu · 孔继烈 · 陈晨 · Jiayi, Hu · 孙祖俊 · 侯彦强 · 李冬

Analytical Chemistry 2025

参数信息

检出限

10⁻⁶ fM

AUC

0.8977

技术优势

只认环状DNA

对线性DNA和基因组DNA片段都不起反应，避免假阳性。

临床样本能落地

在88例癌症患者血浆里成功检出多种肿瘤特异性eccDNA，包括肝癌标志物eccDNA-HCC-1（AUC=0.8977）。

应用场景

• 癌症早筛：检出限低到10⁻⁶ fM，肿瘤早期低丰度eccDNA也能抓住。
• 液体活检：能从血浆里直接测肿瘤eccDNA，不用动刀取样。
• 肿瘤标志物检测：对eccDNA-HCC-1等标志物有高特异识别（AUC=0.8977）。
• 无创诊断：用血液样本就能做癌症诊断，对患者没有创伤。
• ctDNA检测：方法对线性DNA无交叉反应，测的是环状eccDNA而非线性ctDNA。