分裂GFP标签对

一步定量表面展示

用GFP1-10/GFP11和GFP1-9/GFP10-11两套互补系统，在单细胞水平同时确认展示成功并计数展示蛋白数。

Zhang, Li Li · Tan, Ling · Chen, Yunhong · 杨雨 · Yanfei, Zhang · 赵国屏

Microbial Cell Factories 2024

技术优势

一步定量

GFP片段互补后自发组装发光，无需额外染色或洗涤，直接获得单细胞展示数量。

成本极低

只需要常规分子克隆构建融合标签，材料和流程简单，适合常规实验室。

兼容不同锚定蛋白

在SUMO和泛素上用不同锚定蛋白验证了系统可行性，证明标签对不会干扰展示功能。

应用场景

• 细胞表面展示效率分析：用荧光强度直接读出每细胞展示蛋白数，替代传统半定量评估。
• 酵母表面展示工程：在酵母展示文库筛选中同时验证展示并定量，加速候选克隆鉴定。
• 酶展示与固定化：通过共展示分裂GFP标签测量漆酶展示效率，优化酶固定化。
• 微生物表面展示菌株筛选：用荧光信号快速筛选高展示菌株，无需多步染色或分选。
• 展示蛋白荧光定量：利用自发荧光互补进行定量，避免外源染料带来的背景干扰。