单分子实时可视
重组cccDNA与CRISPR-Tag结合，首次在活细胞中以单分子分辨率实时观察HBV cccDNA的动态与分布。
Ding, Jiahui · 易志刚 · Zai, Wenjing · 吴敏 · 陈宝惠 · 蔡启良 · Zhang, Xiaonan · 袁正宏
mBio 2023
通过CRISPR-Tag标记重组cccDNA，可在活细胞中直接观察单个cccDNA分子，无需生化提取或固定。
破坏HBx表达会使cccDNA从dCas9可及区域移位，而HBx回补可恢复可观察的cccDNA焦点数量，证明HBx调控cccDNA的可及性。
该系统可实时追踪细胞分裂时cccDNA的丢失和随机分配，与KSHV附加体的LANA依赖性保留形成对比。
该系统揭示cccDNA附加体在短时间尺度受限扩散，长时间尺度定向运输，暗示其与染色质结构域的并置。