甲基化传感法

0.5 fM 检出限

将双限制性内切酶的特异性、不对称RPA的高效扩增与CRISPR/Cas12a的信号放大相耦合，实现无需PAM序列的DNA甲基化高灵敏检测。

Li, Yi · Peilin, Wu · Yunze, Tai · Fan, Jiwen · Shakir, Imran · Binwu, Ying · 厉害 · Xuping, Sun

Microchemical Journal 2026

参数信息

检出限

0.5 fM

甲基化水平区分能力

1 %

技术优势

区分1%甲基化

甲基化敏感限制酶选择性切割未甲基化DNA，保留甲基化DNA，从而可在混合样本中识别低至1%的甲基化水平。

无需PAM序列

CRISPR/Cas12a在无PAM序列条件下精准识别单链DNA，摆脱了传统CRISPR对PAM位点的依赖，扩大了靶标选择范围。

灵敏度优于常规PCR

通过不对称RPA高效扩增与CRISPR反式切割信号放大，检测灵敏度远超传统甲基化特异性PCR。

应用场景

• 肿瘤早期诊断：可灵敏检测肿瘤特异性基因甲基化，辅助早期癌症筛查。
• 表观遗传标志物检测：定量分析DNA甲基化标志物，用于疾病状态评估。
• 液体活检：从体液中检测微量甲基化DNA，实现无创诊断。
• DNA甲基化分析：提供高灵敏高特异性的甲基化位点检测方法，助力表观遗传研究。