位点特异泛素化
化学合成的位点特异性泛素化组蛋白，可用于探究Clr4甲基转移酶的活性调控机制。
Zhengqing, Li · Ai, Huasong
Angewandte Chemie - International Edition 2026
泛素化修饰使Clr4对核小体底物的甲基转移酶活性比未修饰底物提高约350倍，定量证明了泛素化的直接激活作用。
冷冻电镜结构显示Clr4的固有无序区通过四个不同界面与核小体结合，包括H2A-H2B酸性斑块和H2A/H2B碱性沟槽等，解释了泛素依赖性激活的结构基础。
利用CAET手柄辅助策略化学合成了位点特异泛素化的H3K14Ub组蛋白及核小体，为定量生化和结构研究提供了均一样品。
通过定点光交联和突变分析，鉴定出IDR中与核小体结合及泛素依赖性刺激相关的特定残基；破坏这些界面的突变会削弱Clr4活性。