中温Argonaute核酸酶

DNA引导DNA切割

一种能在宽pH和温度范围、双离子条件下用DNA引导切割DNA的Argonaute核酸酶。

Xu, Xiaoyi · 杨浩 · Dong, Huarong · Li, Xiao · 刘倩 · 冯雁

Bioresources and Bioprocessing 2024

参数信息

最适pH
11
切割温度上限
65 °C
gDNA长度范围
14-30 nt
双链DNA切割温度
65 °C

技术优势

pH 11 仍高效

在碱性pH 11下达到最佳活性,远超多数核酸酶的工作范围,适用于高pH反应环境。

65 °C 仍能切

作为中温酶,PrAgo在25至65 °C均有效切割DNA,尤其在65 °C仍保持高效率,拓宽了热稳定性应用场景。

错配忍受度高

对gDNA中大多数单碱基错配表现出高耐受性,仅在第13和15位受影响,利于在序列不完全匹配时的靶向切割。

无需特定5'碱基

对gDNA的5'端核苷酸无强烈偏好,设计gDNA时不受首碱基限制,简化了引导序列设计。

应用场景