免扩增广谱检测
一种简单工程化的crRNA,通过间隔序列引入切割位点,使CRISPR/Cas12a系统能够直接检测RNA和DNA点突变,无需扩增且灵敏度高。
Zhao, Shuang · Zhang, Qiuting · 李生辉 · 王生 · 周殿明 · 宫晓群
Nano Letters 2025
将crRNA的3'端替换为RNA片段即可识别RNA靶标,无需逆转录或扩增步骤。
间隔序列中的切割位点提高了对ssDNA靶标的单碱基突变特异性,减少脱靶信号。
在临床样本验证中,结合反向荧光增强侧流层析试纸条,实现了飞摩尔级的检测水平。
系统可通过细胞内和活体成像识别肿瘤细胞,拓展了从体外诊断到体内成像的应用范围。