农杆菌介导的转化方法

转化效率提高到 45.6%

通过优化农杆菌转化流程并引入发育调控基因 AtGRF5 或 AtPLT5，显著提高了甜瓜遗传转化效率，且无需依赖特定基因型，为甜瓜精准基因编辑提供了一种高效通用的转化工具。

Wan, Lili · Wang, Zhuanrong · Zhang, Xuejun · Zeng, Hongxia · Ren, Jian · 张娜 · 孙玉宏 · Tang, Mi

Genes 2023

参数信息

转化效率

42.3 %

转化效率

45.6 %

转化效率

33 %

转化效率

32.9 %

技术优势

难转化品种也能做

过表达 AtGRF5 或 AtPLT5 后，在传统难转化的甜瓜品种 ZHF 和 Z12 中都获得了显著高于对照的转化效率，说明该方法摆脱了对特定基因型的依赖。

转化效率翻倍

与传统方法相比，使用 AtGRF5 过表达载体时转化效率在 ZHF 中达到 42.3%，在 Z12 中达到 45.6%，而对照的转化效率显著更低，意味着获得转基因植株所需的外植体数量大幅减少。

基因编辑更高效

将 AtGRF5 或 AtPLT5 表达盒加入 CRISPR/Cas9 载体后，在难转化甜瓜品种的 CmPDS 靶位点观察到多等位基因突变，证明该方法可以直接用于基因编辑并获得纯合或双等位突变体。

应用场景

• 甜瓜基因编辑：快速获得基因编辑甜瓜株系，验证基因功能或改良农艺性状。
• 葫芦科作物改良：在葫芦科作物中建立高效遗传转化平台，加速分子育种。
• 植物遗传转化：克服基因型依赖，提高顽固物种的转化效率，拓宽可转化种质。
• CRISPR/Cas9 植物编辑：配合 CRISPR/Cas9 载体，在难转化品种中实现高效多等位基因编辑。