全细胞催化收率99.9%
通过多位点隧道工程改造的4-羟基苯乙酸3-羟化酶,大幅拓宽底物通道,使大肠杆菌全细胞催化阿魏酸邻位羟化反应几乎完全转化,为多酚类化合物提供一条简单高效的绿色合成路径。
Ping, Sun · 郑璞 · 陈鹏程 · 吴丹
International Journal of Biological Macromolecules 2024
多位点突变体L214A/F301A/Q376A能在12 h内将4 g/L阿魏酸几乎完全转化,且未检测到副产物。
与野生型相比,kcat/Km提高约307倍,底物亲和力与转化能力均大幅提升。
直接使用工程大肠杆菌静息细胞,无需酶纯化或辅因子再生,水相反应条件温和。