双位点哑铃转换器

转化Dam为靶标

借助核酸酶抗性闭环结构，将DNA腺嘌呤甲基转移酶活性稳定转化为可被CRISPR-Cas12a识别的模拟靶标，实现准确灵敏的电化学发光检测。

王震 · Mei-Ling, Zhao · 陆雁 · Lei, Yan · 刘杰 · 卓颖

Analytical Chemistry 2025

具体参数

线性范围

{'zh': '1.0 × 10⁻⁶–1.0', 'en': '1.0 × 10⁻⁶–1.0'} U mL⁻¹

检测限

{'zh': '8.61 × 10⁻⁷', 'en': '8.61 × 10⁻⁷'} U mL⁻¹

技术优势

转换更稳定

哑铃状闭环结构耐受核酸酶降解，避免非特异性酶切造成的假阳性信号转换。

两级放大

变构球形DNAzyme循环再生模拟靶标，持续释放Cas12a激活剂，实现稳健信号放大。

检测限低

采用电化学发光读出，检测限低至8.61×10⁻⁷ U mL⁻¹，适用于低丰度DNA甲基化检测。

应用场景

• DNA甲基化检测：在0.001 U/mL以下仍能检出Dam活性，适合早期低丰度甲基化筛查。
• 生物传感器：将非核酸靶标转化为CRISPR可识别信号，延展了Cas12a传感器的适用靶标范围。
• 精密仪器：集成到电化学发光仪中可对Dam活性进行定量读出，无需额外信号转导模块。