单点突变失结合
F33Y突变通过破坏π-π堆积作用使抗体失去结合DNA的能力,为抗体工程提供新理性设计依据。
倪忠 · 周惠明 · 许颖 · 王志国 · 陈东锋
Protein Journal 2024
明确H-CDR2的贡献大于H-CDR1,且特定芳香族残基的π-π堆积是关键,为理性设计提供明确靶点。
F33Y突变虽增加氢键但破坏π-π堆积,导致抗体完全丧失结合ssDNA的能力,效果明确。
通过CHO细胞表达并纯化抗体,ELISA结果证实所有测试突变体均失去结合能力。