分裂crRNA CRISPR/Cas12a生物传感器

免扩增，多重检测12种miRNA

将分裂crRNA与金纳米颗粒SPR效应结合，通过双酶级联放大，实现无需扩增的超灵敏多重miRNA检测，为乳腺癌精准诊断提供新工具。

Yeling, Yang · Yufei, Yang · Mao, Xuhua · Zhou, Wenhua · Yu, Xuefeng · Mao, Guobin · 马英新

Chemical Engineering Journal 2025

参数信息

检出限（miRNA-9）

3.34 fM

检出限（miRNA-106b-5p）

7.16 fM

多重检测能力

12

技术优势

免扩增

目标miRNA与支架RNA组装成功能性crRNA，直接引导Cas12a识别dsDNA激活剂，无需预先扩增核酸即可触发反式切割，简化流程并降低污染风险。

灵敏度更高

通过将CRISPR/Cas12a与碱性磷酸酶介导的SPR信号增强相结合，形成双酶信号放大策略，对miRNA-106b-5p和miRNA-9的检出限分别达到7.16 fM和3.34 fM。

多重检测

借助微孔板检测技术，可在单次实验中同时检测多达12种乳腺癌相关miRNA，克服个体差异和肿瘤异质性影响，提高诊断准确性。

临床可区分

在血浆样本检测中，该方法能够成功区分乳腺癌患者与健康个体，展示其临床应用潜力。

应用场景

• 乳腺癌早筛：通过多重miRNA检测提高早筛准确性，减少个体差异导致的漏诊。
• 液体活检：直接检测血浆miRNA，避免组织活检创伤，实现无创诊断。
• miRNA检测：免扩增高灵敏检测多种miRNA，简化流程并降低污染风险。
• CRISPR诊断：利用分裂crRNA激活Cas12a反式切割，实现特异、快速的分子诊断。
• 即时检验：微孔板形式适合标准化操作，有望用于资源有限环境下的现场检测。