工程化Fanzor2核酸酶

单AAV递送基因编辑

从真核转座子中挖掘并改造的紧凑型RNA引导核酸酶，突破天然Fanzor在哺乳细胞中低活性的瓶颈，为体内基因治疗提供了小型化编辑工具。

Pan, Deng · Li, Guoling · Yang, Yue · Zhenmin, Wu · Zhou, Min · 陈玉林 · 徐坤 · Wu, Zhaowei · 王小龙

Nature Chemical Biology 2025

参数信息

基因组编辑效率（相对提升）

11.1 ×

TAM识别序列

5'-NMYG

技术优势

编辑效率大幅提升

通过结构预测指导的核酸酶和ωRNA工程化改造，实现了较野生型NlovFz2高11.1倍的基因组编辑效率，达到与已报道TnpB和CRISPR-Cas12f1相当的水平，可直接用于哺乳动物细胞编辑。

TAM识别范围扩展

工程化后的enNlovFz2系统TAM识别范围扩展至5'-NMYG，摆脱了天然酶对特定TAM序列的严格限制，拓宽了可靶向的基因组位点。

单AAV即可体内编辑

紧凑的尺寸使enNlovFz2可通过单个腺相关病毒载体递送，在小鼠胚胎中高效介导基因破坏，并在人源化DMD小鼠模型中恢复抗肌萎缩蛋白表达，无需双载体或多组分系统。

应用场景

• 体内基因编辑：直接在小鼠胚胎中破坏基因，验证功能或构建疾病模型。
• 基因治疗载体：替代SpCas9等大尺寸核酸酶，装入单个AAV载体递送。
• 杜氏肌营养不良治疗：恢复DMD小鼠模型中抗肌萎缩蛋白表达，治疗性靶点验证。
• AAV基因递送：单AAV递送实现体内编辑，避免双载体包装限制。