通用型CRISPR一步检测法

免crRNA免PAM

消除不稳定crRNA输入和PAM依赖,适配RPA扩增且全程闭管,显著降低气溶胶污染风险。

Yao, Li · 刘开永 · Huang, Lin · 博庆丽 · 秦盼柱

Biosensors and Bioelectronics 2025

参数信息

全程检测时间
50 min

技术优势

免额外crRNA

扩增子经T7 RNA聚合酶原位生成crRNA,省去单独合成和添加步骤,简化操作并降低成本。

不依赖PAM

激活由引物末端标签序列触发,而非靶标扩增子,因此不受靶标序列PAM位点限制,可检测任意DNA。

防气溶胶污染

全程在封闭单管内完成扩增和检测,无需转移液体或打开管盖,大幅降低假阳性风险,适合资源有限环境。

可拓展到多病原体

只需更换特异性引物上的标签序列,即可检测不同细菌,已验证金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7和铜绿假单胞菌。

应用场景