对虾U6启动子

基因编辑突变率46%

从对虾基因组中鉴定并优化出活性 U6 启动子，可用于质粒递送 CRISPR/Cas9 时高效表达 sgRNA，填补了虾类缺乏内源 U6 启动子的空白。

Liu, Song · Yifu, Xu · Yaqi, Zhao · 73999371 · 郭华荣

Aquaculture 2024

参数信息

虾细胞突变率

22 %

成虾组织突变率

46 %

技术优势

原生启动子，兼容性高

从对虾自身基因组克隆的 U6 启动子，与虾细胞转录机器天然匹配，相比异源启动子更可能高效驱动 sgRNA。

截短后活性更高

使用截短的 LvU6 B 启动子并引入双 sgRNA 后，虾细胞中突变率从无提高到 22%，成虾组织中达到 46%。

双系统验证有效

在双质粒和一体化质粒递送系统中均验证了启动子驱动 shRNA 的活性，证明其可用于不同实验设计。

应用场景

• CRISPR基因编辑：提供活性 U6 启动子，使 CRISPR/Cas9 在虾类中高效表达 sgRNA。
• 对虾遗传改良：可用于对虾基因敲除，加速经济性状相关基因的功能验证和遗传改良。
• 水产基因组编辑：为水产经济物种提供基因编辑工具，推动分子育种应用。
• 基因编辑工具开发：贡献了一个经过验证的启动子元件，可整合到各类基因编辑载体中。
• 甲壳动物基因功能研究：可在虾类细胞和个体中实现基因编辑，便于解析甲壳动物基因功能。