嗜热真核Argonaute CsAgo

体外切割双链DNA

一种源自嗜热真菌的Argonaute蛋白，可在高温下以DNA引导切割双链DNA，用于简化克隆流程和核酸高灵敏检测。

Guangbo, Yan · Li, Xia · Wang, Longyu · 王飞 · 余晓岚 · Li, Zhongchen · Hou, Jia · 李文强 · Xie, Xiaochen · Zhao, Shuai · 张志伟 · Chen, Wanping · 彭颜红 · Liu, Yang · 马立新

Nucleic Acids Research 2025

参数信息

检测灵敏度

6 copies/reaction

RNA切割活性温度范围

20-90 °C

RNA引导切割ssDNA温度范围

20-50 °C

DNA引导切割dsDNA最低温度

80 °C

技术优势

DNA引导切双链DNA

在≥80°C下，DNA引导的CsAgo能切割质粒双链DNA和线性双链DNA，而现有eAgos多用RNA引导切RNA。

耐高温活性

CsAgo在20-90°C范围内保持RNA切割活性，在≥80°C下仍能切割双链DNA，适用于高温反应体系。

高灵敏检测

基于CsAgo的核酸检测方法灵敏度达6拷贝/反应，可用于低丰度靶标检测。

简化克隆流程

利用CsAgo在高温下切割双链DNA的能力，可以简化常规克隆工作流程，减少步骤。

应用场景

• DNA切割工具：在高温下用DNA引导切割双链DNA，用于基因操作。
• 核酸检测：基于CsAgo的检测灵敏度达6拷贝/反应，可检测低丰度核酸。
• 克隆流程简化：利用高温切割双链DNA能力简化常规克隆步骤。