免实验室现场快检
将反转录重组酶聚合酶扩增与CRISPR-Cas12a反式切割结合,无需复杂仪器即可在蓝光或侧流层析试纸条上读取结果,实现禽流感病毒的现场快速检测。
Zhou, Xu · Wang, Siwen · 马跃 · Li, Yanbing · 邓国华 · 施建忠 · 王秀荣
Virology Journal 2023
采用RPA等温扩增(37-42℃)并用CRISPR-Cas12a反式切割产生荧光或试纸条信号,摆脱了对PCR仪和电泳等设备的依赖,适合现场检测。
对M基因的检测限低至6.7拷贝/μL,对NP基因达12拷贝/μL,足以在感染早期或低病毒载量样本中检出病毒。
对H1-H16亚型禽流感病毒和其他禽源RNA病毒(NDV、IBDV、IBV)均无交叉反应,可准确区分目标病原。
对禽类样本的检测与rRT-PCR和病毒分离法的一致性达97.5%,临床可靠性得到验证。