CRISPR/Cpf1 RNA检测法

10拷贝·μL⁻¹检出

一种利用RT-ERA等温扩增结合CRISPR/Cpf1的RNA病毒检测方法，可在37℃下30分钟内完成免仪器可视化检测，灵敏度比RT-qPCR高10倍。

Xiong, Yifan · Cao, Gaihua · Nie, Fuping · Shi, Meimei · Yang, Jun · Li, Yingguo · 霍丹群 · 侯长军

Process Biochemistry 2023

参数信息

检测限

10 copies·μL⁻¹

相对凝胶电泳的灵敏度

1000

相对RT-qPCR的灵敏度

10

检测时间

30 min

技术优势

灵敏度高

比凝胶电泳灵敏1000倍，比RT-qPCR灵敏10倍，可检测低至10拷贝·μL⁻¹的病毒。

不用大型仪器

通过荧光信号或侧流层析条即可肉眼判读，无需依赖大型设备。

30分钟出结果

整个过程在37℃等温条件下30分钟内完成，适合快速筛查。

等温即可扩增

在37℃下同时完成逆转录和扩增，不需要热循环仪。

应用场景

• RNA病毒检测：可用于口蹄疫病毒的现场快速筛查，无需送检实验室。
• 侧流层析：将扩增产物转化为侧流条上的可视化条带，肉眼即可判读。
• 微流控POCT：方法可在37℃等温完成，适合集成到便携式微流控装置中用于床旁检测。
• CRISPR诊断：利用CRISPR/Cpf1的反式切割活性将特异性识别转化为信号放大，提高检测灵敏度。